Terapia Epigenómica en Lupus Eritematoso Sistémico.

 

Terapia Epigenómica en Lupus Eritematoso Sistémico.
Tema	Modulación epigenética de las respuestas de anticuerpos y autoanticuerpos
Mecanismo Epigenómico tratado	Acetilación/desacetilación de histonas
Cómo se lo hizo	-Se utilizó Epifármacos: Inhibidores de las histonas desacetliasas (HDACi), en este caso ácidos grasos de cadena corta (Ácido Valproico y Butirato) que bloquean las HDAC en las células B del Bazo
Resultados	-Los mecanismos epigenéticos modulan la expresión de la enzima AID o ACIDA (Desaminasa de Citosina Inducida por Activación) que está implicada en la hipermutación somática, conversión y en el cambio de isotipo de inmunoglobulinas y autoanticuerpos en las células B del sistema inmunitario. -Y en los factores de transcripción Blimp-1 y Xbp1, críticos en el proceso de diferenciación de células B que sustentan las respuestas de anticuerpos y autoanticuerpos. -Proporcionan una prueba de principio terapéutico en la autoinmunidad mediada por autoanticuerpos. -Inhibe la diferenciación de las células plasmáticas. -Amortiguan las respuestas de los autoanticuerpos

Referencia bibliográfica:

1. White CA, Pone EJ, Lam T, Tat C, Hayama KL, Li G, et al. Los inhibidores de HDAC regulan al alza los microARN de células B que silencian la expresión de AID y Blimp-1 para la modulación epigenética de las respuestas de anticuerpos y autoanticuerpos en enfermedades autoinmunes. J Immunol [Internet]. 2016 Dec 15 [cited 2020 Sep 3];193(12):5933–50. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4258531/

Técnica de Edición de ácidos nucleicos en Lupus Eritematoso Sistémico

 

CRISPR/cas9 en knockout para determinar genes que predispongan enfermedades autoinmunes como el LES.
Tipo de Edición	In vivo, célula somática.
Dirigidas hacia	ADN que lleva la variante rs692717
Dirigidas por	CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats), ARN guías (gARN)
Uso de Vectores	Plásmido pX458
Órgano/célula a tratar	Células HEK293T. Células embrionarias de Riñón humano.
Vía de administración.	Parenteral
Resultados	Corto plazo: la línea celular 1 demostró una deleción de SNP rs6927172 y la línea celular 2 mostraron deleciones de 12 pares de base incluyendo eliminaciones de 11 pares de base, además de una eliminación de un SNP. Mediano plazo: se observó una reducción significativa en la expresión de ARNm de IL-20RA, OLIG3, y TNFAIP3. Largo plazo: se presentó una reducción en la expresión de genes de TNFAIP3 e IL-20RA, expresados en gran cantidad en enfermedades autoinmunes, el estudio sirve para comprender los mecanismos moleculares que sirven para regular la transcripción de genes en células inmunes o animales en un futuro.

Referencias bibliográficas:

1.           Wu J, Yang S, Yu D, Gao W, Liu X, Zhang K, et al. CRISPR/cas9 mediated knockout of an intergenic variant rs6927172 identified IL-20RA as a new risk gene for multiple autoimmune diseases as systemic lupus erythematosus. Genes Immun [Internet]. el 23 de febrero de 2019 [citado el 27 de agosto de 2020];20(2):103–11. Disponible en: https://sci-hub.tw/https://www.nature.com/articles/s41435-018-0011-6#

Terapia con Stem Cells en LES.

 

Trasplante de células madre mesenquimales de cordón umbilical en el lupus eritematoso sistémico activo y refractario: un estudio clínico multicéntrico.
Tipo de Stem cells.	Células Madres Mesenquimales pluripotentes del cordón umbilical.
Método de Obtención	Las UC MSC fueron preparadas por el Stem Cell Center, donde se obtuvo CU frescos de madres sanas informadas en hospitales de maternidad, los cuales se enjuagaron con solución salina, con fosfato de penicilina y estreptomicina y se extrajo la sangre haciéndolo flotar en medio Eagle de Dulbeco, incubándolas 37°, se después de la observación de colonias similares a fibroblastos después de 10 días, se tripsinizaron y se pasaron a otro matraz, pasando con una rigurosa purificación y control de calidad.
Vía de administración.	Se administró un millón de células por kg de peso corporal mediante infusión venosa
Usos.	A corto plazo: presentaron una respuesta clínica mayor con un incremento BILAG C (British Isles Lupus Assessment Group Index) en todos los órganos. A largo plazo: la enfermedad lúpica disminuye significativamente, mejorando completamente la puntación BILAG la puntuación SLEDAI, con un aumento de los niveles de albúmina, disminución de anticuerpos anti-DNA bicatenario. También se encontraron mejoras en la función renal expresadas por la creatinina sérica que recupero los valores normales.

Referencia:

1. Wang D, Li J, Zhang Y, Zhang M, Chen J, Li X, et al. Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study. Arthritis Res Ther [Internet]. el 25 de marzo de 2014 [citado el 21 de agosto de 2020];16(2):R79. Disponible en:  https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4060570/

ADN recombinante

 1. Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza: En Drosophila existe una variación en la tasa de recombinación durante la meiosis femenina a lo largo de la longitud de los cromosomas, la proteína MEI-218 específica de la meiosis forma un complejo de proteínas esenciales para la formación de cruces dentro del crossing-over de 5 genes mei-218 en la Meiosis de la Drosophila melanoganster, la cual puede ser evidenciado en ensayos transgénicos posteriores demostrando que la divergencia funcional en mei-218 sugieren que su tasa de cruce y patrones son funciones separables. (1).

2. Ejemplo de ADN recombinante en el LES.

Creación de una vacuna con el epítopo de ADN de la IL-17A para tratar el LES en ratones, donde se inyectó un gen plasmídico que codifica una proteína de union al nucleo de HBc, donde se obtuvo como resultado la producción con exito de anticuerpos anti-IL17A en el grupoHBc-IL-17A,  donde la vacuna suprimió significaivamene el daño a tejido renal y la infiltración de macrófagos debido a la reducción del TNF-a. Como consecuencia los ratones mostraron una mayor tasa de supervivencia y redujo el daño orgánico(2).

3. Transgénico Animal: mediante la técnica de transferencia nuclear de células somáticas se obtuvo modelos porcinos para estudiar y aplicar tratamientos en enfermedades humanas, donde resaltan la Fibrosis Quística, la Distrofia Muscular de Duchenne, el Alzheimer, Modelos de Cancer porcino, Enfermedades cardiovasculares, Diabetes mellitus. Ademas los cerdos han sido utilizados como biorreactores de productos farmaceúticos para la producción de proteínas recombinantes terapeúticas que se pueden obtener de la leche, sangre, orina, plasma, clara de huevo, recolectarlas, purificarla y usarlas a escala industrial. (3).

Referencias

1. Brand CL, Wright L, Presgraves DC. Positive selection and functional divergence at meiosis genes that mediate crossing over across the Drosophila phylogeny. G3 Genes, Genomes, Genet [Internet]. el 1 de octubre de 2019 [citado el 14 de agosto de 2020];9(10):3201–11. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6778797/

2. Koriyama H, Ikeda Y, Nakagami H, Shimamura M, Yoshida S, Rakugi H, et al. Development of an IL-17A DNA vaccine to treat systemic lupus erythematosus in mice. Vaccines [Internet]. el 1 de marzo de 2020 [citado el 15 de agosto de 2020];8(1). Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7157613/

3.Hryhorowicz M, Lipiński D, Hryhorowicz S, Nowak-Terpiłowska A, Ryczek N, Zeyland J. Application of Genetically Engineered Pigs in Biomedical Research [Internet]. Vol. 11, Genes. NLM (Medline); 2020 [citado el 14 de agosto de 2020]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7349405/