Prueba PCR para el diagnóstico de LES. |
|
Tema (T): |
Diagnóstico
de Lupus Eritematoso Sistémico en relación a polimorfismos Na1 y Na2 en
pacientes bolivianos. |
Objetivos (O): |
Identificar y
establecer la existencia de la asociación de los polimorfismos Na1 y Na2 del
receptor FcyRiiib con susceptibilidad al LES. |
Tipo de Muestra Biológica (M): |
Se recolectó
una cantidad de 5 ml de sangre venosa en tubos Vacutainer anticoagulados con
EDTA.3K. |
Secuencia o Gen a amplificar (G): |
Se realizó una tipificación
genética del receptor FcyRiiib para los alelos Na1 y Na2 según el protocolo
de Hong y col. De los alelos específicos para los antígenos: NA1 Sentido 5’ CTC AAT GGT ACA GGG TGC TC 3’ NA1 Anti Sentido
5’ GGC CTG GCT TGA GAT GAG GT 3’ NA2 Sentido
5’ CTC AAT GGT ACGGCG TGC TT 3’ NA2 Anti sentido 5’ CAC CTG TAC TCT CCA CTG TCG TT 3’ |
Tipo de Ácido Nucleico a ser extraído (AN): |
ADN
genómico de los pacientes |
Extracción (Ex): |
Se aisló el ADN con el
uso del kit comercial Wizard Genomic DNA purification del Instituto SELADIS. |
Tipo de PCR (PCR): |
Se usó
una PCR-RFLP en un termociclador PX2 en 30 ciclos con Desnaturalización a
94°C en 1 min. Hibridación a 63°C por 1 min. Elongación a 72°C por 1 min. Y una
extensión final a 72°C por 10 min, |
Visualización (V): |
Se visualizó por
electroforesis en gel de agarosa al 2.5% a un voltaje constante de de 3V/cm
en tapón TBE 1X que generó 118 pb en NA1 y 171 pb en NA2 en una longitud de
onda de 254 nm. |
viernes, 17 de julio de 2020
Prueba PCR para el Lupus Eritematoso Sistémico.
Yanarico J.; Luna M.; Sosa L.; Terán M.; Relación de los polimorfismos Na1 y Na2 del receptor FcyRiiib con lupus eritematoso sistémico en pacientes bolivianos. Rev.Cs.Farm. y Bioq. [revista en la Internet]. Junio de 2016 [Citado el 17 de Julio de 2020] ; 4(1): 85-92. Disponible en: http://www.revistasbolivianas.org.bo/pdf/rcfb/v4n1/v4n1_a08.pdf
Suscribirse a:
Entradas (Atom)